自鼻腔拭子中分离到了兔支气管败血波氏杆菌,2ml以上试验组的发病保护率均在9xxxx以上(表2)。
表2 家兔对波氏杆菌的免疫效力试验
批次
攻毒保护率(﹪)
1ml组
2ml组
3ml组
对照组
010615
70
100
90
0
010628
60
95
100
0
010709
75
100
95
0
010720
65
95
90
0
3 结论与讨论
3.1 关于菌液的生产工艺
制苗用兔巴氏杆菌及波氏杆菌菌液的培养采用了(血清)马丁琼脂平板培养的方法,不仅容易得到高浓度的纯菌液,也避免了液体培养时菌液中非抗原物质对动物机体的影响;菌液灭活后经管式分离机离心去甲醛,从而避免了疫苗中的非抗原性化学物质对动物造成不必要的刺激;离心后的菌液经反复冻融,可使细菌的细胞壁破裂或通透性增加,细菌细胞内的多种抗原成分被释放出来,这样配苗时各抗原组分与蜂胶佐剂的相互作用更加充分,从而可增强疫苗的免疫效果。
3.2 关于蜂胶佐剂的提取工
艺
蜂胶疫苗自问世以来,已在多种畜禽传染病的预防中得到应用。遗憾的是,用于疫苗佐剂的蜂胶,大多是蜂胶的乙醇粗提液。本研究中,我们采用了8xxxx的乙醇来提取蜂胶,既能提取到蜂胶中的黄酮类等醇溶成分,又能保留一部分水溶性的活性物质。所得的蜂胶醇提液用温控式旋转蒸发器蒸发掉乙醇,然后通过大量试验,选择了适当的助溶剂,使蜂胶浸膏可以以任意比例与水互溶,这样就避免了乙醇对动物体强烈的刺激作用,增强了疫苗的安全性。疫苗的效力试验表明,我们选择的这种助溶剂不会降低蜂胶的佐剂效应。值得注意的是,目前市场上的蜂胶原胶质量良莠不齐,掺假现象时有发生,选择优质的原胶才能保证其提取物良好的佐剂效应。
3.3 对兔巴氏杆菌-波氏杆菌二联蜂胶灭活苗的评价
经不同日龄家兔的单剂量单次免疫、单剂量重复免疫以及大剂量单次免疫试验,表明本疫苗安全无毒副作用,适用于30日龄以上的家兔使用,使其产生坚强的免疫保护作用。
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